胞外蛋白的检测方法

胞外蛋白的检测方法

周实际201211986

马晓龙201211984

徐杭州201211967

内容提

1胞外蛋白及其分析方法

2

荧光光度法

3分光光度法

4

结论

胞外蛋白(PN)

•胞外多聚物(EPS)——由细菌分泌、细菌表面物

质的脱落、细菌溶解以及对周围环境物质的吸附

而产生的分布在细胞表面的高分子物质；

•——微生物聚集体的重要组成部分；

•——主要组分多糖(PS)和蛋白质(PN)。

胞外蛋白对污泥沉降性能的影响

•PN——提高污泥表面疏水性；

降低污泥表面负电性。

•PN可以改变微生物表面的性质，从而促进

微生物细胞凝聚，利于颗粒污泥的形成。

胞外蛋白对重金属离子的吸附

胞外聚合物是生物膜中能有效吸附重

金属离子的关键成分,胞外聚合物中存在着

大量阴离子基团(羧基、羟基、硫酸根等),

对不同类型金属离子表现出强烈的亲和性

而胞外多糖和胞外蛋白在胞外聚合物中所

占比例很大。

科研前沿

长春市南湖天然水环境中生物膜优势菌

种胞外蛋白对镉的吸附特征及其影响因素。

结果表明,胞外蛋白对镉的吸附过程符合

Freundlich热力学等温方程。

PN的分析方法

•PN分析步骤：PN的提取PN的分析。

•PN提取方法：物理、化学方法,及物化综合法。

国内外报道过提取方法有加热、超声、离心和加

碱、EDTA等。

•提取PN方法的操作过程：

高速

离心加热超声热碱EDTA

与处理后的污泥样品各40ml

冰水浴1mol/LNaOH10ml2%

80℃35W调节pH至11EDTA

60min40min80℃加热10min4℃，3h

20000r/min高速离心，4℃，30min

0.22µm微滤膜过滤，去除PN提取液中的细胞

透析膜（6000-8000Da）4℃3h

•PN分析方法：分光光度法、化学发光法、紫外光

度法、免疫分析法、高效液相色谱法、纳米粒子

法、等离子体共振法、荧光光度法、共振瑞利散

射光谱法、过渡金属羟基碎片法等。

•目前应用最多的是分光光度法，其次就是荧光光

度法。

PN的分光光度分析法

•定义：分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波

长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。

光谱曲线：在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定

浓度的样品溶液时，便可得到不同波长相对应的吸收强度。如以波长

（λ）为横坐标，吸收强度（A）为纵坐标，就可绘出该物质的吸收光

谱曲线。

利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法，称为分光

光度法，也称为吸收光谱法。用紫外光源测定无色物质的

方法，称

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